Среда "ГибриС-1-293"

Данный продукт предназначен для исследовательских целей.

Описание:

Бессывороточная, безбелковая питательная среда Гибрис-1-293 (для суспензионной культуры клеток НЕК-293) представляет собой растворенную в деионизованной воде смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и синтетических заменителей сыворотки, простерилизованную фильтрованием через фильтры с размером пор 0,22 мкм.
Среда Гибрис-1-293 характеризуются химически определенным составом компонентов и не содержат продуктов гидролиза белков животной или растительной природы в качестве обогатителей.
Препарат - прозрачная жидкость, желтого цвета, без опалесценции и осадка, рН от 7,2 до 7,4.

Назначение:

Среда Гибрис-1-293, предназначена для высокоэффективного суспензионного культивирования клеток рекомбинантных клонов и линий НЕК-293 в биотехнологических процессах.
Сывороточных культур клеток НЕК-293 к бессывороточным условиям суспензионного культивирования.

Форма выпуска:

Препарат выпускают в пластиковых флаконах (450±5,0 мл).

Способ применения:

• Вскрыть флакон в асептических условиях.
• Внести селективные добавки и питательные компоненты, необходимые для роста и продукции рекомбинантных веществ в суспензионной культуре клеток линии НЕК-293.
• Разлить подготовленную среду в культуральные емкости или системы биореакторного культивирования.
• Осуществить пассаж клеток в конечной плотности 2,0-5,0 х 10⁵ кл/мл.
• Инициировать процесс культивирования в условиях, определяемых его задачами.

Примечание: с целью достижения высоких плотностей суспензионных культур клеток НЕК-293, а также продуктивности и качества рекомбинантных белков в биотехнологических процессах предполагается использование специальных подпиток (Feeds). Качественный и количественный состав подпиток определяется клиентом, исходя из особенностей конкретного процесса.

 Показатели роста культуры адаптированной линии HEK-SF(ПанЭко) в среде «Гибрис-1-293» в условиях модельного биореакторного культивирования.

Лабораторная установка: шейкер для СО₂-инкубатора Celltron (Infors, Швейцария) с использованием колб Эрленмейера 100-125мл (рабочий объем 25-30мл) или биореакторных флаконов ПанЭко 75мл (рабочий объем 10-15мл), скорость перемешивания 115-130об/мин; 37^оС, 5-6% СО₂.

Посевная культура: HEK-SF (ПанЭко), выращенная до плотности 1,0-2,0 х 10⁶ кл/мл в неперемешиваемой (культуральный флакон) или  перемешиваемой культурах (колба, биореакторный флакон). Начальная плотность культуры в пассаже 2,5 х 10⁵ кл/мл.

Оценка результатов теста: количественные и биохимические показатели эффективности культивирования клеток НЕК начинают с 72 часов от пассажа.

Достижение максимума плотности по количеству жизнеспособных клеток в условиях стационарной культуры без подпиток (Batch culture) в среде «Гибрис-1-293» происходит на 6-7 сутки от начала культивирования, в зависимости от природы клона/линии НЕК-293 или особенностей системы суспензионного культивирования. Для линии HEK-SF (ПанЭко) этот показатель достигает в максимуме уровня 1.8-2.5 х 10⁶ кл/мл.

 Срок годности: 1 год.

 Условия хранения и транспортировки: хранить при температуре 2 - 8°С в защищенном от света месте. Транспортировать всеми видами крытого транспорта при температуре 2- 8°С.