Добавка НейроМакс, 50-кратная, стер., 10 мл (-15...-20°С)

Данный продукт предназначен для исследовательских целей.

Назначение:

Продукт используется для оптимизации базовых рецептур сред, предназначенных для поддерживающего культивирования клеток нервной ткани центральной и периферической нервной системы. Отмечена эффективность Добавки В-27 в процессах длительного культивирования нейронов гиппокампа и ретинальных ганглиев. Область применения: нейробиология, биомедицинские исследования.

Рекомендуемая основа среды для оптимизации:  Нейробазальная  (Neurobasal™ Medium).

Основные характеристики изделия:

Не содержит сыворотки. Содержит витамины, антиоксиданты, гормоны, липиды, альбумин, инсулин, трансферрин.

Поддерживаемые культуры клеток нейронального происхождения:

• Эмбриональные и пренатальные нейробласты и прогениторы;
• Нейроны нервной ткани взрослого человека;
• Первичные культуры опухолевых клеток и постоянные клеточные линии опухолевых тканей нервной системы;
• Эмбриональные нейроны полосатого тела и среднего мозга крысы (EGF-стимулированная прогрессия роста).

Протокол применения:

Одного флакона продукта (10 мл) достаточно для сапплементации 500 мл оптимизируемой среды. Перед использованием, продукт размораживают в течение ночи при 4^° С.

Описанная процедура тестирования была применена с целью культивирования нейронов гиппокампа и коры мозга 18-дневного эмбриона крысы, а также клеточных линий нейробластомы.

1. Покрыть поверхность культуральной емкости адгезивом: стерильный водный раствор поли-D-лизина 0,05 мг/мл из расчета 0,15 мл/см²(выдержать 1 час при комнатной температуре).
2. Удалить раствор адгезива и дважды ополоснуть поверхность стерильной деионизованной водой. Полностью подсушить емкости в ламинарном шкафу. Использовать сразу или хранить в холодильнике до 2 недель.
3. Изолировать первичные нейроны крысы или использовать культуру замороженных нейронов согласно стандартным лабораторным протоколам.
4. Осуществить пассаж клеток в преинкубированной или прогретой при 37^° С полной среде Нейробазальная. Рекомендуемая плотность пассажа ~160 кл./см². (Для нейронов гиппокампа используется полная среда с добавлением 25 мкМ L-Глутамата).
5. Инкубировать сосуды 37^° С в стандартных условиях СО₂-инкубатора, однако, предпочтительно снижение парциального содержания кислорода до 9% .
6. Через 4-24 часа заменить ½ среды свежей.
7. В случае негиппокампальной культуры нейронов: через 4 дня после пассажа заменить ½ среды свежей. Для гиппокампальной культуры нейронов: через 3 дня после пассажа заменить ½ среды свежей без L-глутамата. С периодичностью в 3 дня повторять процедуру. (Введение 25 мкМ 2-меркаптоэтанола увеличивает выживаемость и сроки культивирования нейронов гиппокампа in vitro).

Срок годности: 2 года.

Условия хранения и транспортировки:

 Хранить при температуре -10…-20^° С в  защищенном от света месте. Транспортировать с использованием морозильного оборудования или термоконтейнера.