Среда ЭКО 1 "ИКСИ", с фен. кр., без антибиотиков

НАЗНАЧЕНИЕ

Среда ЭКО 1  «ИКСИ» предназначена для содержания в ней ооцитов в процессе инъекции сперматозоида во время проведения процедуры ИКСИ.

Среда ЭКО 1  «ИКСИ» используется во вспомо­гательных репродуктивных технологиях, предназначена к применению в лечебно-профилактических и научно-исследова­тель­ских учреждениях.

ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ИЗДЕЛИЯ

Основой среды ЭКО 1  «ИКСИ» является вода очищенная, соли Эрла, глюкоза. Среда приготовлена на основе бикарбонатного буфера, не содержит альбумин.

Среда ЭКО 1 «ИКСИ» может быть приготовлена как с добавлением антибиотиков и фенолового красного, так и без этих компонентов (по желанию заказчика). Среда ЭКО 1 «ИКСИ» простери­лизована фильтро­ванием через фильтры с размером пор 0,22 мкм.

ПРОТОКОЛ ПРИМЕНЕНИЯ

1.         Перед использованием приоткрытый флакон со средой ЭКО 1 «ИКСИ»выдерживают в атмосфере 5-6% СО₂ при температуре 37 °С в течение 2 ч.

2.         В центр чашки Петри помещают каплю (10-15 мкл) нагретой до 37 °С среды ЭКО 1 «ПВП».

3.         В зависимости от количества ооцитов, которые будут использоваться в процедуре ИКСИ, раскапывают необходимое количество капель среды ЭКО 1 «ИКСИ»в той же чашке Петри.

4.         Все капли должны быть покрыты слоем жидкого парафинового масла, предварительно уравновешенного в атмосфере 5-6% СО₂ при температуре 37 °С в течение 2 ч.

5.         После внесения в чашку капель со средой и покрытия их маслом рекомендуется выдержать чашку в СО₂-инкубаторе в течение небольшого промежутка времени для того, чтобы уровень рН и температура вернулись на необходимый уровень.

6.         В каплю со средой ЭКО 1 «ПВП» вносят 2 мкл подготовленных и отмытых сперматозоидов.

7.         Ооциты непосредственно перед использованием перемещаются в капли со средой ЭКО 1 «ИКСИ», по одному ооциту в каждую каплю. Процедура инъекции сперматозоида производится внутри этих капель.

8.         Проводят фиксацию одного спермато­зо­ида с помощью инъекционной  микро­пипетки. Инъекцию сперматозо­ида рекомендуется проводить в как можно меньшем объеме среды ЭКО 1 «ПВП». 

9.         Затем проводят фиксацию ооцита с помощью холдинг-пипетки. Важно зафи­ксировать ооцит таким образом, чтобы полярное тельце находилось в позиции на 6 или на 12 ч.

10.      Инъекционную микропипетку вводят в ооцит в положении на 3 ч. Для подтверждения прокола блестящей оболочки рекомендуется аспирировать часть цитоплазмы.

11.      Если пипетка проникла внутрь цитоплазмы, то сперматозоид с частью аспирированной цитоплазмы вводят внутрь ооцита.

12.      После введения сперматозоида подают давление в холдинг-пипетке и ооцит отсоединяется.

13.      После проведения инъекции ооциты промывают и инкубируют в  урав­новешенной среде ЭКО 1 «Универ­саль­ная» в течение 16-18 ч.

14.      По истечении этого времени проверяют формирование пронуклеусов в ооцитах.

15.      Для дальнейшего культивирования используют зиготы с двумя пронуклеусами.

16.      Дальнейшее культивирование проводят в новой порции уравновешенной среды    ЭКО 1 «Универсальная» или ЭКО ПРО «Дробление».

17.      Культивирование можно проводить до стадии 4-8 бластомеров, затем эмбрионы можно переносить в среду для последующего культивирования до стадии бластоцисты (ЭКО ПРО «Бластная»), либо переносить в полость матки для имплантации в среде ЭКО ПРО «Швартовая».

СРОК ГОДНОСТИ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ

Срок годности среды – 3 месяца со дня изготов­ления при условии соблюдения режима хранения.

Хранить и транспортировать в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8 °С в защи­щенном от света месте.

Не замораживать!

Неиспользованный остаток нагретой среды, не подлежит повторному нагреванию и исполь­зованию.

Продукт должен быть использован в течение 7 дней с момента первого вскрытия флакона.

Рекомендуется хранить среду с минимальным объёмом воздуха во флаконе.

Вскрытие флакона должно производиться в стерильных условиях.